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HiGeneinvivo转染试剂 C1507
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
C1507-0.5 | HiGeneinvivo转染试剂 | 0.5ml | 980元 |
C1507-1 | HiGeneinvivo转染试剂 | 1ml | 1860元 |
C1507-5 | HiGeneinvivo转染试剂 | 5ml | 8370元 |
描述:HiGene是经过特殊交联修饰的新一代阳离子聚合物,其高密度阳离子基团与带负电的核酸结合形成致密的纳米复合物,通过内吞入胞。在细胞内HiGene有效缓冲内吞小体的pH,保护核酸免受降解,并高效介导基因转运到胞浆胞核表达。HiGene有血清转染效率更高,并允许细胞在铺板时或铺板后立即转染,其卓越的in vitro和in vivo转染能力堪比jetPEI、Lipofectamine 2000、ExGen 500、FuGENE、Polyfect、SuperFect等转染试剂。HiGene是广谱转染试剂,可转染的细胞包括A497,A549, BHK, Caco-2, C-26, C2C12, C3H/10T, CHO, COS1, COS7, Sf9, HeLa, HEK293, HT-29, MCF7, NIH3T3, Jurkat, K562, RAW264.7, THP1, U937, PC12, L929, SHY-5Y, Vero,原代神经元、原代肝细胞、皮肤成纤维细胞、人牛血管内皮细胞、单核/巨噬细胞、人胚胎干细胞等。HiGene高效转染siRNA或寡聚核苷酸,并有优异的整体动物转染能力,介导基因在心肺肾肝脾等各种组织高效表达。
特征:
有血清转染,转染前后可不更换培养基
细胞铺板时立即转染,节省时间
媲美Lipofectamine 2000, jetPEI, FuGENE
高效转染siRNA、DNA、寡聚核苷酸
in vitro转染细胞谱广,包括各种原代细胞和神经元
in vivo动物转染,心肺肾肝脾等高效表达
自备试剂:无菌150mM NaCl即0.9%生理盐水或无菌蒸馏水或PBS缓冲液,用于离体细胞转染制备转染混合物。5%无菌葡萄糖,用于离体或在体转染转染混合物制备。与复合物颗粒形成有关,勿用其它缓冲液替代。
DNA、siRNA和寡聚核苷酸:建议溶于灭菌蒸馏水。质粒DNA高纯度OD260/280 ~1.8,无内毒素。可用内毒素清除剂(#D1501)清除内毒素。寡聚核苷酸和用于RNA干扰(siRNA)的核苷酸,可单独或与质粒DNA共转染,但必须使用经HPLC或凝胶洗脱纯化去除杂链的高纯度片段。siRNA和寡聚核苷酸与DNA转染及优化操作相似,但对其用量进行细致的优化很重要。
细胞准备(重要!)
接种细胞数:参见附表细胞计数接种。培养时间:转染前应培养~24h,使之处于分裂和旺盛生长期。细胞密度与转染时机:培养~24h后,细胞覆盖培养皿表面积的70~90%时为转染最佳时机。低密度细胞的转染率并不低,但总细胞数少因而蛋白表达总量也不会很高。在较高细胞密度时转染较好,但100%长满的细胞转染效率很低,因此接种细胞要均匀,以减少因局部紧密接触而致生长抑制的难转染细胞,否则最好重头接种细胞。HiGene允许在细胞铺板时或铺板后立即转染,效果与贴壁后转染相似,但大大节省时间和劳动,适合高通量筛选。甚至一些难转染细胞也可尝试此即时转染方法。血清和培养基:HiGene具有卓越的转染能力,血清和抗生素不影响转染,在10~30%血清培养基转染表达效率更高。转染混合物体积为培养基的1/10,参见表第5栏。如果培养基未明显变黄,转染前可不更换。如转染结果满意,转染后无需更换培养基。但转染混合物稀释了培养基,转染4~8小时后换培养基会可进一步增加转染效率。
蛋白研究:蛋白提取、蛋白定量、Western Blot…核酸研究:核酸提取、PCR、核酸电泳… 抗体:单克隆抗体、多克隆抗体、酶标抗体… 细胞生物学:转染试剂、生化测定、细胞培养…
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