尿素氮(BUN)含量测定试剂盒(二乙酰肟显色法) E2020
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
E2020 | 尿素氮(BUN)含量测定试剂盒(二乙酰肟显色法) | 100-300次 | 220元 |
描述:尿素是体内蛋白质分解代谢的含氮终产物,构成了血液中绝大部分的非蛋白氮。尿素产生于肝脏,经肾脏排泄至尿中,其含量取决于蛋白质摄入量,蛋白质分解代谢和肾功能。血清(浆)中尿素测定是临床中反映肾小球滤过功能的常用指标。试剂盒采用二乙酰肟显色法,操作简单,特异性强,重复性佳,线性范围0.03-14mmol/L。
原理: 根据Fearon反应,在强酸性和加热条件下,尿素与二乙酰一肟缩合生成红色的二嗪衍生物,在540nm处有最大吸收峰,光密度值在一定范围内与尿素含量成正比。
适用:血清、血浆 、尿液
组成:(微孔测定300个样本,1cm比色杯100个样本)
R1试剂50ml
R2试剂5ml
16mM尿素标准品 0.5ml
以上组分4℃保存, 12个月有效
所需设备:酶标仪、721、722型可见光分光光度计。最佳工作波长540nm,如无此波长建议选用520nm。
操作步骤:
一、工作液配制:将R1试剂与R2试剂按10:1的比例混合均匀,现配现用。
二、标准品稀释:将16mM标准品用蒸馏水倍比稀释为8、4、2、1、0.5、0.25、0.125mM通常取8、4、2、1、0.5mM五个点即可,注意设置0浓度空白对照。
三、尿素浓度测定
(1)参照下表加样,充分混匀(可按比例调整整体上样量)。
尿液样本建议稀释1:10—1:50倍,若超出线性范围,需再稀释。
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酶标板测定加样比例 |
1 ml比色杯测定的加样比例 |
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空白管 |
标准品 |
样本管 |
空白管 |
标准品 |
样本管 |
蒸馏水µl |
3 |
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10 |
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标准品µl |
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3 |
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10 |
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样品µl |
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3 |
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10 |
工作液µl |
165 |
165 |
165 |
550 |
550 |
550 |
(2)请使用耐高温管于100°C沸水浴或金属浴中孵育15min。立即冷水冷却5min。反应平衡后,30min内颜色稳定。
(3)使用酶标仪或可见光分光光度计,540nm空白管调零后,进行测定。
(4)以OD值为y轴,尿素浓度为x绘制标准曲线并计算尿素浓度。
说明:
(1) 目前实验研究中,已基本采用直接测定尿素浓度反应肾脏滤过功能,试剂盒测定的数值即为尿素浓度,单位为mmol/L。
(2) 正常血清尿素浓度参考值2.86~8.20 mmol/L。
(3) 尿素氮是指尿素分子氨基中的N含量(blood urea nitrogen, BUN),检测结果多用mg/dl为单位,尿素和尿素氮换算公式:
尿素mg/dL*0.1665=尿素mmol/L
尿素mg/dL *(28.02/60.60)=BUN mg/dL
(4)试剂盒仅限于科研,操作时请佩戴手套。
蛋白研究:蛋白提取、蛋白定量、Western Blot…核酸研究:核酸提取、PCR、核酸电泳… 抗体:单克隆抗体、多克隆抗体、酶标抗体… 细胞生物学:转染试剂、生化测定、细胞培养…
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